綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測；
（6）取液儲(chǔ)存；通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
冬蟲夏草（斜面）說明書 | Ophiocordy | EY-J963312 |
資源名稱: 冬蟲夏草（斜面）
種屬: Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G.H. Sung J.M. Sung Hywel-Jones
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究；教學(xué)。食藥用菌
培養(yǎng)基: 綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，二氫鉀 3g，鎂 1.5g，葡萄糖 20g，1 10mg，瓊脂 20g，pH自然，121℃，15min。
低溫存法:
①簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶兩級(jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。
Burkholderia vietnamiensis 中文名稱：越南伯克霍爾德氏菌Burkholderia vietnamiensis提供形式:凍干安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33或109生長條件:30℃ 純度：98%
Kurthiasibirica 中文名稱：西伯利亞庫特氏菌Kurthiasibirica安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:107生長條件:25℃ 純度：97%
Viridibacillusarenosi 中文名稱：ViridibacillusarenosiViridibacillusarenosi分離基物:土壤，荷蘭安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:110生長條件:30℃ 純度：97%
Rummeliibacillusstabekisii 中文名稱：RummeliibacillusstabekisiiRummeliibacillusstabekisii安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃ 純度：97%
Acidovorax│facilis 中文名稱：敏捷食菌Acidovorax│facilis提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:A2生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：CP,98%
Pseudomonasluola 中文名稱：PseudomonasluolaPseudomonasluola分離基物:人類傷口安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:104生長條件:30℃ 純度：指示劑級(jí)
Thalassospirapermensis 中文名稱：ThalassospirapermensisThalassospirapermensis分離基物:鹽礦附近的污染土壤安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:102生長條件:30℃ 純度：指示劑級(jí)
Maritimibacralkaliphilus 中文名稱：MaritimibacralkaliphilusMaritimibacralkaliphilus分離基物:海，大西洋安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:102生長條件:30℃ 純度：≥99%
冬蟲夏草（斜面）說明書50260人支氣管上皮細(xì)胞微小RNA3--2,4-二氟苯甲DYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標(biāo)簽DYKDDDDK Tag分支肽
50270人氣管上皮細(xì)胞微小RNA3--2,4-二氟苯甲T7 tag(recombinant T7-tagged proteins) T7 tag標(biāo)簽抗原
50240人小氣道上皮細(xì)胞微小RNA炔胺鹽鹽V5 tag(recombinant V5-tagged protein) V5 tag多肽抗原
酵母提取（膏）人肺成纖維細(xì)胞微小RNA炔胺鹽鹽KT3 tag KT3 tag標(biāo)簽抗原
50090人支氣管平滑肌細(xì)胞微小RNA環(huán)磺酰胺VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag標(biāo)簽抗原
50092人氣管平滑肌細(xì)胞微小RNA環(huán)磺酰胺HLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原
50093人骨骼肌細(xì)胞微小RNAHLA-E 人類白細(xì)胞抗原E
50094人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞微小RNAAnti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷移率族蛋白A1抗原
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