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實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：

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細(xì)胞名稱  腦多型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；BT-325
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞系于1985年由北京神經(jīng)外科研究所建立。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

傳代方法: 1:3傳代；3-4天一次

傳代情況: PN4

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè): 熒光法（-）
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Orientin 2''-O-rhamnoside

CAS No.：81398-30-3

中文名：

分子式：C27H30O15

cis紫莖女貞苷B （95%） 訂購(gòu)|咨詢 　彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2) 規(guī)格： 10mg

異虎耳草素 訂購(gòu)|咨詢 　彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2) 規(guī)格： 20mg

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三白草 訂購(gòu)|咨詢 　彈性蛋白酶2B(ELA2B) 規(guī)格： 20mg

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鵝去氧膽 訂購(gòu)|咨詢 　彈性蛋白酶3B(ELA3B) 規(guī)格： 20mg

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蓮心 訂購(gòu)|咨詢 　蛋白17(Sp17) 規(guī)格： 20mg

紅景天苷 訂購(gòu)|咨詢 　蛋白C(PROC) 規(guī)格： 20mg

告庭 訂購(gòu)|咨詢 　蛋白C(PROC) 規(guī)格： 20mg

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綠原 訂購(gòu)|咨詢 　蛋白C(PROC) 規(guī)格： 20mg

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蟾靈 訂購(gòu)|咨詢 　蛋白C抑制因子(PCI) 規(guī)格： 20mg

SIRT4/SIR 2 like protein 4  沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白4抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Gracillin

TRIB3/p65 interacting inhibitor of NFkappaB  神經(jīng)細(xì)胞死亡誘導(dǎo)蛋白激酶抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Yohimbine HCl

SERCA1 ATPase  肌漿/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Yohimbine HCl

GRK5  G蛋白偶聯(lián)受體激酶5抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Phentolamine mesilate

EDG3  內(nèi)皮分型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Phentolamine mesilate

TNFAIP3 interacting protein 3/ABIN3  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)相互作用蛋白3抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Vemurafenib,PLX 4032

RISC/Serine carboxypeptidase 1  絲羧肽酶1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Praeruptorin E

APS  APS抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Praeruptorin A

亞錫  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Tin(II)oxide  含量:CP，98%

青  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Piperacillin  含量:BR，牛心，95%

野靛  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Cytisine  含量:BR

野黃芩甙  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Scutellarin  含量:AR，95%

葉綠醌  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:VK1  含量:顯色劑

葉綠素A  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:ChlorophyllA  含量:BR，中粘度200

葉綠素  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Chlorophyll  含量:BR，85%

葉綠素鎂  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:ChlorophyllB  含量:BR，低粘度100

葉綠銅  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Chlorophyllin  含量:BR，98%

葉  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:PGA  含量:色固
腦多型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；BT-325強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂(DRCA)規(guī)格：250g用途：用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)

四硫磺鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)（TTB）規(guī)格：250g用途：用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)

念珠菌顯色培養(yǎng)基規(guī)格：1000ml用途：用于念球菌分離和鑒定，白色念珠菌顯綠色

煙測(cè)定培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于嬰兒食品和乳粉中煙和測(cè)定

XLT4瓊脂規(guī)格：250g用途：用于食品中致病菌，特別是沙門氏菌分離培養(yǎng)

動(dòng)力-硝鹽培養(yǎng)基規(guī)格：20支詳情介紹