產品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠組織勻漿、細胞提取物中的熱休克蛋白 40(HSP-40)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于分子伴侶調控、應激反應及蛋白質折疊研究等領域。
產品名稱:大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)elisa試劑盒
英文名稱:HSP-40 ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-5554E
檢測原理:

大鼠熱休克蛋白 40 (HSP-40) ELISA 試劑盒的原理是?雙抗體夾心法?,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
?固相化?:微孔板預先包被抗大鼠 HSP-40 抗體。
?結合?:加入標準品或樣本,HSP-40 被固相抗體捕獲。
?檢測?:加入生物su化的抗大鼠 HSP-40 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
?顯色?:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
?測定?:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min;濃縮洗滌液按說明書稀釋混勻。
2.設孔加樣設空白、標準品、待測樣品孔,精準加樣,封板。
3.溫育結合37℃孵育 30–60 min,棄液拍干。
4.洗板加滿洗滌液浸泡,甩干拍干,重復3–5 次。
5.加酶結合物除空白孔外每孔加 HRP 標記液,封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗凈未結合游離酶,控干殘留液體。
7.顯色避光加顯色液 A/B,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數加終止液變色穩定后,立刻酶標儀讀 OD 值。
9.結果計算標準曲線擬合,換算樣本濃度。