本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的肺表面活性物質相關蛋白B（SP-B）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達0.16 ng/mL，適用于肺部發育、呼吸功能及肺部疾病研究等領域。
產品名稱 |
小鼠肺表面活性物質相關蛋白Belisa試劑盒 | 英文名稱 | SP-B ELISA Kit |
貨號 | CS-1129E | 規格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理：
固相化：微孔板預先包被抗小鼠SP-B抗體。
結合：加入標準品或樣本，SP-B被固相抗體捕獲。
檢測：加入純化的抗小鼠SP-B抗體和HRP標記的親和素，形成"抗體-抗原-酶標抗體"復合物。
顯色：加入TMB底物，被HRP催化后由藍色變為黃色。
測定：用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值)，濃度與OD值成正比。
樣本要求：
1. 樣本處理
1) 血清：無菌無熱源采血管采集，避免溶血 / 脂血；1000×g 離心 10 min 取上清，-20℃分裝，禁反復凍融。
2) 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝（慎用肝素），離心分離上清。
3) 細胞上清：1000×g 離心除碎片，-70~-80℃保存。
4) 組織勻漿：預冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿，高速離心取清亮上清低溫保存。
2. 通用注意
嚴禁加NaN3抑制 HRP 活性；杜絕溶血、渾濁、污染樣本；全程低溫防降解；超標樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋，實驗建議設置復孔。
操作步驟：
1.試劑提前室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔，精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結合反應，結束后棄孔內液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗，重復洗板 3–5 次，去除未結合雜質。
5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶結合物，再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體，保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色，待梯度藍色清晰顯現。
8.加入終止液終止反應，顏色由藍轉黃，即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據標準曲線擬合計算，得出樣本目標物質濃度。
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