產品簡介：
本試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿中的抗甲狀腺球蛋白抗體（ATGA/TGAB）濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于自身免疫性甲狀腺炎、格雷夫斯病及甲狀腺自身免疫病研究等領域。
產品名稱：大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體elisa試劑盒
英文名稱：ATGA/TGAB ELISA Kit
產品規格：48T/96T
產品貨號：CS-5728E
檢測原理：
大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體 (ATGA/TGAB) ELISA 試劑盒的原理是?間接法?，通過固相載體包被抗原，捕獲樣本中特異性抗體，再用酶標記的二抗進行識別，最后通過底物顯色反應來定量檢測。
?固相化?：微孔板預先包被甲狀腺球蛋白抗原。
?結合?：加入標準品或樣本，ATGA/TGAB 抗體與固相抗原結合。
?檢測?：加入 HRP 標記的抗大鼠 IgG 二抗，與結合在固相載體上的抗體形成復合物。
?顯色?：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
?測定?：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?：
?試劑準備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復5次。
?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍變黃）。
?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內完成。
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操作步驟?：
1.試劑準備
將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標準品按說明書進行梯度稀釋，配制系列濃度標準曲線溶液。
2.實驗流程
加樣：設置空白孔、標準孔、待測樣品孔，空白孔僅加稀釋液，其余孔分別加入標準品或待測樣品，37℃孵育。
加酶標抗體：除空白孔外，每孔加入酶標抗體，輕輕混勻，37℃避光孵育。
洗滌：棄去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后甩干，重復洗滌 4-5 次，最后拍干殘留液體。
顯色：每孔加入 TMB 顯色液，37℃避光孵育，孔內呈現藍色。
終止：每孔加入終止液，混勻后顏色由藍色轉為黃色。
檢測：在 450nm 波長下測定各孔 OD 值，15 分鐘內完成讀數。
3.關鍵提示
實驗全程嚴格控溫，孵育時使用封板膜避免蒸發。
洗滌需充分，否則易造成高背景、結果偏差。
顯色液需避光，終止順序與加樣順序保持一致，確保充分混勻。
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