產品簡介:

本試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿中的抗環胍氨酸肽抗體(Anti-CCP-antibody)濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于類風濕關節炎診斷、自身免疫病及關節炎癥研究等領域。
產品名稱:大鼠抗環胍氨酸肽抗體elisa試劑盒
英文名稱:Anti-CCP-antibody ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-5731E
檢測原理:

大鼠抗環胍氨酸肽抗體 (Anti-CCP-antibody) ELISA 試劑盒的原理是?間接法?,通過固相載體包被抗原,捕獲樣本中特異性抗體,再用酶標記的二抗進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
?固相化?:微孔板預先包被環胍氨酸肽抗原。
?結合?:加入標準品或樣本,Anti-CCP-antibody 抗體與固相抗原結合。
?檢測?:加入 HRP 標記的抗大鼠 IgG 二抗,與結合在固相載體上的抗體形成復合物。
?顯色?:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
?測定?:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

1.平衡試劑:試劑盒室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按比例稀釋備用。
2.加樣:設空白孔、標準品孔、樣品孔,每孔加對應標準品 / 稀釋后樣本,封板溫育。
3.溫育反應:37℃孵育 30–60 min,完成抗原抗體結合。
4.洗板:棄液甩干,洗滌液注滿每孔,浸泡后拍干,重復洗板3–5 次。
5.加酶結合物:除空白孔外,每孔加入 HRP 標記抗體,封板 37℃再次溫育。
6.再次洗板:同上述洗板流程,洗凈未結合游離酶標物。
7.顯色:每孔先后加入 A、B 顯色液,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數:加終止液終止反應,顏色由藍變黃;立即用酶標儀在對應波長測定 OD 值。
9.結果計算:以標準品濃度、OD 值繪制標準曲線,換算樣本待測指標濃度。